RESUMO E EXPLICAÇÃO DO TESTE
A leishmaniose visceral, ou calazar, é uma infecção disseminada causada por várias subespécies do L. donovani.A doença é estimada pela Organização Mundial da Saúde (OMS) em aproximadamente 12 milhões de pessoas em 88 países.É transmitida aos humanos pela picada do flebotomíneo Phlebotomus, que adquire a infecção ao se alimentar de animais infectados.Embora seja uma doença encontrada em países pobres, no sul da Europa, tornou-se a principal infecção oportunista em pacientes com AIDS.A identificação do organismo L. donovani a partir do sangue, medula óssea, fígado, gânglios linfáticos ou baço fornece um meio definitivo de diagnóstico.Detecção sorológica de anticorpos anti-L.donovani IgM é considerado um excelente marcador para a leishmaniose visceral aguda.Os testes usados na clínica incluem ELISA, anticorpos fluorescentes ou testes de aglutinação direta 4-5.Recentemente, a utilização da proteína específica de L. donovani no teste melhorou drasticamente a sensibilidade e a especificidade.
O Leishmania IgG/IgM Combo Rapid Test é um teste sorológico baseado em proteína recombinante, que detecta anticorpos IgG e IgM para L. Donovani simultaneamente.O teste fornece um resultado confiável em 15 minutos sem nenhum instrumento.
PRINCÍPIO
O Leishmania IgG/IgM Rapid Test é um imunoensaio cromatográfico de fluxo lateral.O cassete de teste consiste em: 1) uma almofada de conjugado cor de vinho contendo antígeno L. donovani recombinante conjugado com ouro coloidal (conjugados de Leishmania) e conjugados IgG-ouro de coelho, 2) uma tira de membrana de nitrocelulose contendo duas bandas de teste (bandas T1 e T2) e uma banda de controle (banda C).A banda T1 é pré-revestida com IgM anti-humano monoclonal para a detecção de anticorpos anti-L.donovani IgM, a banda T2 é pré-revestida com reagentes para a detecção de anticorpos anti-L.donovani IgG, e a banda C é pré-revestida com IgG anti-coelho de cabra.
Quando um volume adequado de amostra de teste é dispensado no poço de amostra do cassete, a amostra migra por ação capilar através do cassete.A L. donovani IgM, se presente na amostra, se ligará aos conjugados de Leishmania.O imunocomplexo é então capturado na membrana pelo anticorpo IgM anti-humano pré-revestido, formando uma banda T1 cor de vinho, indicando um resultado de teste positivo para L. donovani IgM.A L. donovani IgG, se presente na amostra, se ligará aos conjugados de Leishmania.O imunocomplexo é então capturado pelos reagentes pré-revestidos na membrana, formando uma banda T2 de cor bordô, indicando um resultado de teste positivo para L. donovani IgG.
A ausência de quaisquer bandas T (T1 e T2) sugere um resultado negativo.O teste contém um controle interno (banda C) que deve exibir uma banda cor de vinho do imunocomplexo de cabra anti coelho IgG/coelho IgG-ouro conjugado independentemente do desenvolvimento de cor em qualquer uma das bandas T.Caso contrário, o resultado do teste é inválido e a amostra deve ser testada novamente com outro dispositivo.
